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      FLT3-ITD [D835del]/BaF3

      CBP73241

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      I. Background

            FLT3-ITD 基因是 FLT3 基因的一种突变形式,属于 FMS 样酪氨酸激酶家族,位于人类 13 号染色体长臂(13q22.2)。该基因编码的蛋白是一种跨膜受体蛋白,属于 III 型受体酪 氨酸激酶(RTK)家族成员,在造血细胞的生长、增殖和分化中发挥关键作用。

            FLT3-ITD 突变是 FLT3 基因近膜结构域的内部串联重复,通常发生在 14/15 号外显子 上,插入的重复序列长度一般 3-400 bp 不等,且总是以三倍的倍数出现,保留转录本的阅读框。这种突变导致 FLT3 蛋白在无配体结合的情况下发生二聚体化并持续自我磷酸化, 增强激活酪氨酸激酶活性,使得下游信号通路(如 RAS/MAPK、PI3K/AKT 等)持续激活, 导致细胞增殖失调。

       
      II. Description

            BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。顺利获得引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。
       



      Figure 1. 
      FLT3-ITD[D835del] BaF3 细胞的构建原理图

       
      III. Introduction

      Cell Line Name:

      FLT3-ITD [D835del]/BaF3

      Host Cell:

      Ba/F3

      Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)

      Freeze Medium:

      90% FBS+10% DMSO

      Complete Culture Medium:

      RPMI-1640+10% FBS+2 μg/ml Puromycin

      Mycoplasma Status:

      Negative

       
      IV. Representative Data

      1.FLT3-ITD [D835del]/BaF3


      Figure 2. WB of 
      FLT3-ITD [D835del]/BaF3.

      2. Anti-proliferation assay

      Figure 3. CTG Proliferation Assay of FLT3-ITD [D835del] BaF3(C4).


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